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北京快3【求助】关于非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
发布时间 2020-11-28 20:29
电极缓冲液是pH值为8.8的Tris-Gly缓冲液,无SDS,我的目的蛋白的等电点为6.5.
蛋白样品是没有经过变性处理的,是细菌超声破碎后分别取上清和沉淀(PBS重悬)直接加5Xloading buffer混匀上样的,跑了2h后考马斯亮蓝染液染色1h,脱色过夜。
同样的样品也经过变性处理跑了SDS-PAGE的,但SDS-PAGE中可清晰看到总蛋白条带和目的蛋白条带。
沉淀样品几乎看不到任何条带,上清样品有条带,北京快3但都集中在整个胶体的上半部分,北京快3!且条带非常细,与对照相比无明显的差异,只是每个条带的量稍微多些。